低熔点琼脂糖法回收DNA片段优缺点（低熔点琼脂糖）

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1、琼脂糖凝胶的配制⑴琼脂糖凝胶的制备：称取0.3g琼脂糖，置于三角瓶中，加入30ml TBE或TAE缓液，置于三角瓶中，加入30ml TBE或TAE缓液，置于三角瓶中，加入30ml TBE或TAE缓液，将该三角瓶置于微波炉加热至琼脂糖溶解。

2、将冷却至65℃左右的琼脂糖凝胶液，加入溴化乙锭，充分混匀。

3、⑵胶板的制备：①取有机玻璃内槽，洗净、晾干；②将有机玻璃内槽置于一水平位置模具上，安好挡板，放好梳子。

4、吸取少量琼脂糖溶液封固胶膜边缘，任其凝固，在距离底板0.5～1.0mm的位置上放置梳子，以便加入琼脂糖后可以形成完好的加样孔。

5、如果梳子距离玻璃板再近，则拔出梳子时孔底将有破裂的危险，破裂后将使样品在凝胶与玻璃板之间渗漏。

6、③将剩余的温热琼脂糖溶液倒入胶膜中，使胶液缓慢地展开，直到在整个有机玻璃板表面形成均匀的胶层。

7、凝胶的厚度在3～5mm之间，检查一下梳子的齿下或齿间是否有气泡。

8、 ④室温下静置30min左右，待凝固完全后，轻轻拔出梳子，在胶板上即形成相互隔开的上样孔。

9、制好胶后将铺胶的有机玻璃内槽放在含有0.5～1×TAE（Tris-乙酸） 或TBE（Tris-硼酸）工作液的电泳槽中使用，没过胶面1mm以上。

10、（注：溴化乙锭是一种强烈的诱变剂并有中度毒性。

11、使用含有该染料的溶液时必须戴手套。

12、使用完后应该进行净化处理。

13、通常用水配制成10mg／ml的贮存液在室温下避光储存，使用终浓度为0.5μg／ml。

14、）。

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